Tìm kiếm
Đang tải khung tìm kiếm
Kết quả 1 đến 1 của 1

    THẠC SĨ Khảo sát thành phần và tỷ lệ loài ký sinh trùng sốt rét tại huyện bù đăng, tỉnh bình phước bằng kỹ thuật nhuộm giêm sa và nested - pcr

    VipHư Trúc Hư Trúc Đang Ngoại tuyến (2601 tài liệu)
  1. Gửi tài liệu
  2. Bình luận
  3. Chia sẻ
  4. Thông tin
  5. Công cụ
  6. Khảo sát thành phần và tỷ lệ loài ký sinh trùng sốt rét tại huyện bù đăng, tỉnh bình phước bằng kỹ thuật nhuộm giêm sa và nested - pcr

    MỞ ĐẦU

    1. Đặt vấn đề
    Sốt rét là một bệnh lây qua đường máu, do ký sinh trùng sốt rét (KSTSR)
    truyền từ người bệnh sang người lành bởi muỗi Anopheles (hay còn gọi là muỗi đòn
    xóc). Sốt rét là một trong những căn bệnh gây tử vong hàng đầu thế giới. Theo Tổ
    chức Y tế thế giới (WHO), hiện có 106 quốc gia và vùng lãnh thổ có sốt rét lưu
    hành. Hàng năm, có khoảng 350 đến 500 triệu người mắc sốt rét và gần 1 triệu
    người tử vong do sốt rét, đa số là phụ nữ và trẻ em ở châu Phi [30].
    Trước đây, được biết có 4 loài KSTSR gây bệnh cho người là Plasmodium
    falciparum (P. falciparum), Plasmodium vivax (P. vivax), Plasmodium malariae (P.
    malariae), Plasmodium ovale (P. ovale). Gần đây, một số báo cáo cho thấy
    Plasmodium knowlesi (P. knowlesi), một ký sinh trùng (KST) của loài khỉ, cũng có
    thể gây bệnh cho người.
    Bệnh sốt rét thường dễ bị nhầm lẫn với các bệnh gây sốt khác như: cảm cúm,
    sốt Dengue, sốt mò, thương hàn Đồng thời, mỗi loài KSTSR có chu kỳ phát triển
    và bệnh lý khác nhau. Đặc biệt, ký sinh trùng (KST) P. falciparum nếu không được
    chẩn đoán và điều trị kịp thời có thể dẫn đến sốt rét ác tính với các triệu chứng sốt
    rét não, đái huyết cầu tố, thiếu máu nặng, suy thận, suy gan, trụy tim mạch . gây tử
    vong. Do đó, chẩn đoán chính xác và kịp thời loài KSTSR gây bệnh là một khởi đầu
    quan trọng đối với công tác điều trị.
    Xác định thành phần, cơ cấu của KSTSR tại một khu vực góp phần cung cấp
    số liệu cho việc hoạch định chính sách thuốc, cung cấp phác đồ điều trị cho từng
    vùng, xây dựng bản đồ dịch tễ sốt rét và chiến lược phòng chống phù hợp.
    Phương pháp soi lam máu nhuộm Giêm sa nhận biết hình thể đặc trưng của
    các loài KSTSR dưới kính hiển vi là phương pháp xét nghiệm thường quy được áp
    dụng rộng rãi trong mọi điều kiện thực địa cũng như trong phòng thí nghiệm để
    chẩn đoán, phát hiện KSTSR. Phương pháp này được xem như là “chuẩn vàng”
    2
    trong đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu của các kỹ thuật xét nghiệm chẩn đoán sốt rét
    mới.
    Với sự phát triển của khoa học kỹ thuật, một số phương pháp mới đã được
    nghiên cứu, triển khai đã cung cấp những hướng nghiên cứu mới về KSTSR. Đặc
    biệt, phương pháp Polymerase Chain Reaction (PCR) ngoài việc phát hiện được
    KSTSR ở mật độ thấp (1KST/1àl máu) còn có khả năng xác định các trường hợp
    nhiễm phối hợp nhiều loài KSTSR giúp chẩn đoán, điều trị bệnh kịp thời; qua đó,
    hạn chế tình trạng KST kháng thuốc sốt rét, cung cấp dẫn liệu về thành phần và tỷ lệ
    loài KSTSR ứng dụng trong việc lập bản đồ dịch tễ sốt rét.
    Tại Việt Nam, trong những thập niên qua, cùng với sự phát triển và những
    thành tựu của ngành y tế, công tác phòng chống sốt rét (PCSR) đã đạt được những
    kết quả đáng kể, làm giảm số người mắc, số người chết và hạn chế bùng phát dịch
    sốt rét, góp phần vào sự nghiệp chăm sóc và bảo vệ sức khỏe nhân dân. Tuy nhiên,
    do nước ta có điều kiện thuận lợi về địa lý, khí hậu cho sự phát triển của muỗi
    Anopheles, trung gian truyền bệnh; cơ cấu KSTSR tại những vùng sốt rét lưu hành
    có sự thay đổi; đồng thời, trình độ dân trí và ý thức phòng chống bệnh một số nơi
    chưa cao, cộng với hiện tượng di dân tự do làm cho tình hình bệnh sốt rét vẫn còn
    diễn biến phức tạp.
    Được sự quan tâm và đầu tư của Chính phủ, tỉnh Bình Phước nằm trong
    vùng kinh tế trọng điểm phía Nam bao gồm các tỉnh, thành phố: TP. Hồ Chí Minh,
    Đồng Nai, Bà Rịa - Vũng Tàu, Bình Dương, Bình Phước, Tây Ninh, Long An và
    Tiền Giang. Đây cũng là một trong những địa phương có tình hình sốt rét lưu hành
    nặng. Tỉnh Bình Phước với dân số 894.941 người (năm 2010), toàn tỉnh có 856.477
    người sống trong vùng sốt rét lưu hành (chiếm 95,7% dân số). Theo thống kê năm
    2010, cả nước có 54.297 ca mắc sốt rét, riêng tỉnh Bình Phước có 3.566 ca (chiếm
    tỷ lệ 6,7%) [21].
    Do đó, để thực hiện tốt công tác chăm sóc sức khoẻ nhân dân, việc nghiên
    cứu thành phần, tỷ lệ loài KSTSR của tỉnh Bình Phước để có biện pháp can thiệp
    đúng, hạn chế sự lây truyền và tiến đến loại trừ bệnh sốt rét là việc làm cần thiết.
    Huyện Bù Đăng, tỉnh Bình Phước là một trong hai nơi có lượng KST cao nhất tỉnh Bình Phước. Tiến hành nghiên cứu tại đây sẽ cho biết cơ cấu và thành phần KST chính xác nhất. Ngoài ra, đây là nơi đã có báo cáo hiện tượng giảm tác dụng của thuốc sốt rét artesunat, chọn địa điểm này sẽ giúp hiểu biết sâu hơn về cơ cấu, thành phần KST, giúp đề ra các biện pháp khắc phục.
    2. Mục tiêu nghiên cứu
    Khảo sát thành phần và tỷ lệ loài KSTSR tại huyện Bù Đăng, tỉnh Bình Phước bằng kỹ thuật nhuộm Giêm sa và Nested - PCR.
    3. Nội dung thực hiện
    + Xác định thành phần và tỷ lệ KSTSR bằng kỹ thuật nhuộm Giêm sa.
    + Xác định thành phần và tỷ lệ KSTSR bằng kỹ thuật Nested - PCR.
    + So sánh kỹ thuật nhuộm Giêm sa và kỹ thuật Nested - PCR trong việc phát hiện KSTSR.

    MỤC LỤC

    Lời cam đoan
    Mục lục
    Danh mục các chữ viết tắt
    Danh mục các bảng
    Danh mục các hình vẽ, đồ thị
    MỞ ĐẦU 1
    CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4
    1.1. Bệnh sốt rét 5
    1.1.1. Định nghĩa 5
    1.1.2. Ký sinh trùng sốt rét 5
    1.1.3. Véc tơ truyền bệnh sốt rét 7
    1.1.4. Vật chủ cảm thụ 8
    1.1.5. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình lây truyền bệnh sốt rét 9
    1.2. Phân bố và cơ cấu KSTSR trên thế giới và Việt Nam 9
    1.2.1. Phân bố và cơ cấu KSTSR trên thế giới 9
    1.2.2. Phân bố và cơ cấu KSTSR ở Việt Nam 10
    1.3. Tình hình sốt rét của Việt Nam và huyện Bù Đăng, tỉnh Bình Phước 12
    1.3.1. Tình hình sốt rét của Việt Nam 12
    1.3.2. Tình hình sốt rét của huyện Bù Đăng, tỉnh Bình Phước 14
    1.4. Các kỹ thuật xét nghiệm phát hiện KSTSR 15
    1.4.1. Kỹ thuật nhuộm Giêm sa 15
    1.4.2. Các test chẩn đoán nhanh (rapid diagnostic test) 18
    1.4.3. Phương pháp nhuộm nhanh AO (Acridine Orange) 20
    1.4.4. Phương pháp QBC (Quantative Buffy Coat) 20
    1.4.5. Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) 20
    1.5. Điều trị sốt rét 24
    1.5.1. Nguyên tắc điều trị 24
    1.5.2. Thuốc sốt rét theo nhóm người bệnh, chủng loại KSTSR 25
    1.6. Các biện pháp phòng chống bệnh sốt rét 25
    CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26
    2.1. Đối tượng, thời gian, địa điểm nghiên cứu 27
    2.1.1. Đối tượng 27
    2.1.2. Thời gian 27
    2.1.3. Địa điểm 27
    2.2. Vật liệu nghiên cứu 27
    2.2.1. Mẫu chứng dương 27
    2.2.2. Vật liệu của kỹ thuật nhuộm Giêm sa 27
    2.2.3. Vật liệu của kỹ thuật PCR 28
    2.2.3.1. Hóa chất dùng để tách chiết DNA 28
    2.2.3.2. Hóa chất dùng cho phản ứng PCR 28
    2.2.3.3. Hóa chất dùng cho điện di 29
    2.3. Các thiết bị chính 30
    2.4. Phương pháp nghiên cứu 30
    2.4.1. Thiết kế nghiên cứu 30
    2.4.2. Phương pháp thu thập số liệu 30
    2.4.2.1. Cỡ mẫu 30
    2.4.2.2. Thu thập mẫu máu ngoại vi trên lam kính 31
    2.4.2.3. Thu thập mẫu máu trên giấy thấm Whatman 3MM 31
    2.4.3. Kỹ thuật nghiên cứu 31
    2.4.3.1. Kỹ thuật nhuộm Giêm sa 31
    2.4.3.2. Kỹ thuật soi kính hiển vi phát hiện KSTSR 32
    2.4.3.3. Kỹ thuật tách chiết DNA để thực hiện phản ứng PCR 33
    2.4.3.4. Kỹ thuật Nested - PCR phát hiện KSTSR 34
    2.4.3.5. Điện di trên gel agarose 35
    2.5. Phương pháp giải trình tự 35
    2.6. Các chỉ số đánh giá 36
    2.7. Y đức 37
    CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 38
    3.1. Kết quả 39
    3.1.1. Kết quả xác định thành phần và tỷ lệ KSTSR bằng kỹ thuật
    nhuộm Giêm sa 39
    3.1.2. Kết quả xác định thành phần và tỷ lệ KSTSR bằng kỹ thuật
    Nested - PCR 45
    3.1.3. So sánh kỹ thuật nhuộm Giêm sa và kỹ thuật Nested - PCR
    trong việc phát hiện KSTSR 51
    3.1.4. Kết quả giải trình tự 54
    3.2. Bàn luận 55
    3.2.1. Thành phần, tỷ lệ loài KSTSR tại các điểm thu thập mẫu 55
    3.2.2. Những trường hợp khác biệt kết quả giữa kỹ thuật Giêm sa
    và kỹ thuật PCR 56
    3.2.3. Phát hiện những ca nhiễm KSTSR hiếm gặp 59
    3.2.4. Ký sinh trùng lạnh 60
    3.2.5. Thay đổi về cơ cấu KSTSR của huyện Bù Đăng, tỉnh Bình Phước 61
    KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 63
    A. Kết luận 64
    B. Kiến nghị 65
    DANH MỤC CÔNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ
    TÀI LIỆU THAM KHẢO
    PHỤ LỤC

    Xem Thêm: Khảo sát thành phần và tỷ lệ loài ký sinh trùng sốt rét tại huyện bù đăng, tỉnh bình phước bằng kỹ thuật nhuộm giêm sa và nested - pcr
    Nội dung trên chỉ thể hiện một phần hoặc nhiều phần trích dẫn. Để có thể xem đầy đủ, chi tiết và đúng định dạng tài liệu, bạn vui lòng tải tài liệu. Hy vọng tài liệu Khảo sát thành phần và tỷ lệ loài ký sinh trùng sốt rét tại huyện bù đăng, tỉnh bình phước bằng kỹ thuật nhuộm giêm sa và nested - pcr sẽ giúp ích cho bạn.
    #1
  7. Đang tải dữ liệu...

    Chia sẻ link hay nhận ngay tiền thưởng
    Vui lòng Tải xuống để xem tài liệu đầy đủ.

    Gửi bình luận

    ♥ Tải tài liệu

social Thư Viện Tài Liệu
Tài liệu mới

Từ khóa được tìm kiếm

Nobody landed on this page from a search engine, yet!

Quyền viết bài

  • Bạn Không thể gửi Chủ đề mới
  • Bạn Không thể Gửi trả lời
  • Bạn Không thể Gửi file đính kèm
  • Bạn Không thể Sửa bài viết của mình
  •  
DMCA.com Protection Status